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        Bradford蛋白定量試劑盒

        簡要描述:Bradford蛋白定量試劑盒基于考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合后, 產生藍色化合物,反應迅速而穩定??赏ㄟ^檢測595nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量。

        • 產品型號:AP12L015
        • 廠商性質:生產廠家
        • 更新時間:2024-04-18
        • 訪  問  量:1184

        詳細介紹

        品牌其他品牌貨號AP12L015
        規格500T供貨周期現貨
        主要用途通過檢測595nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量應用領域生物產業
        Bradford蛋白定量試劑盒

        產品描述
          Bradford 法蛋白定量是基于考馬斯亮藍G-250與蛋白質結合后, 產生藍色化合物,反應迅速而穩定。反應化合物在465-595nm處有大的光吸收值,化合物顏色的深淺與蛋白濃度的高低成正比關系,因此可通過檢測595nm的光吸收值的大小來計算蛋白的含量。
        訂購信息

        產品名稱 貨號 規格 價格
        Bradford蛋白定量試劑盒 AP12L015 500 T 128


        產品組分

        產品編號 產品組成 包裝規格
        AP12L015 Bradford試劑 A 100 mL
        蛋白標準(5mg/ml BSA) 1 mL
        說明書 一份

        保存方法
          冰袋運輸,Bradford試劑A 2-8°C保存,蛋白標準品-20°C保存,保質期一年。
        使用方法

        方案一、試管檢測
        1、試劑準備
        (1)取適量5mg/ml蛋白標準,PBS稀釋至終濃度為2mg/ml蛋白標準。配制后可立即使用,也可以-20°C長期保存。
        (2)稀釋BSA標準品:用與待測蛋白樣品相一致的稀釋液按下表稀釋BSA標準品。
        表1:BSA標準品配制表

        標準品編號 稀釋液體積μl 標準品用量μl 標準品濃度μg/ml
        1 0 100 2000
        2 50 150 1500
        3 200 200 1000
        4 200 200(從3號管中取) 500
        5 200 200(從4號管中取) 250
        6 200 200(從5號管中取) 125
        7 200 0 0

        (3)取干凈的試管,將30μl稀釋好的BSA標準品分別加到作好標記的試管中。
        (4)取干凈的試管,分別加入30μl待測蛋白樣品(原液或稀釋液),并作好標記,推薦每個樣品做2-3 個平行反應。
        2、樣品孵育及檢測
        (1)向上一步驟配制的不同濃度的標準品BSA和待測樣品試管中各加入1.5ml Bradford蛋白定量試劑,充分混勻,室溫放置10分鐘。
        (2)用分光光度計測定595nm 處的吸光值。
        3、制作標準曲線和計算樣品濃度
        (1)利用Excel或其他軟件繪制標準曲線,并計算樣品中的蛋白濃度。
        (2)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。
        方案二、微孔檢測
        1、試劑準備
        (1)將按表2稀釋好的BSA標準品和待測蛋白樣品(原液或稀釋液)各5μl分別加到作好標記的96孔板微孔中。推薦每個樣品做2-3 個平行反應。
        表2:BSA標準品配制表

        標準品編號 稀釋液體積μl 標準品用量μl 標準品濃度μg/ml
        1 0 20 2000
        2 10 30 1500
        3 40 40 1000
        4 40 40(從3號管中取) 500
        5 40 40(從4號管中取) 250
        6 40 40(從5號管中取) 125
        7 40 0 0

        2、樣品孵育及檢測
        (1)每孔加入250μl Bradford蛋白定量試劑,充分混勻,蓋上96孔板蓋,室溫放置10 分鐘。
        (2)用酶標儀測定595nm處的吸光值。
        3、制作標準曲線和計算樣品濃度
        (1)繪制標準曲線,計算樣品中的蛋白濃度。
        (2)如果所得到的蛋白濃度不在檢測范圍內,請重新稀釋樣品后再次測定。
        注意事項

        1、樣品中若含有去垢劑會影響檢測結果,請試用 BCA 蛋白濃度測定試劑盒;
        2、要得到更為準確的蛋白濃度結果,每個蛋白梯度和樣品均需做復孔, 每次均應做標準曲線;
        3、需準備 37°C水浴或溫箱、酶標儀或普通分光光度計,測定波長為 465-595nm 之間,595nm合適。酶標儀需與 96孔酶標板配套使用。使用分光光度計測定蛋白濃度時,試劑盒測定的樣品數量會因此而減少。使用溫箱孵育時,應注意防止因水份蒸發影響檢測結果。
        4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。


         

         

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