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        當前位置:首頁 > 產品中心 > 核酸合成與提取 > RNA提取 > AP01L204柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒

        柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒

        簡要描述:柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒創新性地采用過柱純化的方法,能夠快速、溫和、高效地裂解動物組織或細胞,有效提取總蛋白,包括離心管柱和經過優化的細胞裂解液。與傳統的 RIPA 裂解液相比,本試劑盒可以提取出更多的蛋白,避免在細胞裂解過程中由于 DNA 沉淀和不溶性細胞碎片導致的部分蛋白丟失。

        • 產品型號:AP01L204
        • 廠商性質:生產廠家
        • 更新時間:2024-05-13
        • 訪  問  量:308

        產品分類

        Product Category

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        詳細介紹

        品牌Life-iLab/李記生物貨號AP01L204
        規格100T供貨周期現貨
        應用領域生物產業

        產品描述
        本試劑盒創新性地采用過柱純化的方法,能夠快速、溫和、高效地裂解動物組織或細胞,有效提取總蛋白,包括離心管柱和經過優化的細胞裂解液。與傳統的 RIPA 裂解液相比,本試劑盒可以提取出更多的蛋白,避免在細胞裂解過程中由于 DNA 沉淀和不溶性細胞碎片導致的部分蛋白丟失。采用過柱純化技術,最小可處理 20 μL 樣本與裂解液混合物,最大可達 500 μL。提供變性和非變性兩種細胞裂解液,用戶可根據后續的實驗需求選取不同的裂解液?!咀ⅰ浚鹤冃粤呀庖嚎捎糜?SDS-PAGE,Western-blotting, ELISA 分析;非變性裂解液可用于 IP,Co-IP,enzymeassays 等分析。
        訂購信息

        產品名稱貨號規格
        柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒AP01L204100T

        產品組分

        產品組分100T
        變性裂解液60mL
        非變性裂解液60mL
        蛋白提取離心管柱100個
        組織研磨棒10個

        運輸與保存
        常溫運輸。常溫保存,有效期12個月?!咀ⅰ浚貉心グ艨芍貜褪褂?。
        使用方法
        細胞樣品
        一、 樣品裂解
        變性液提取
        1. 去除細胞培養液,用預冷的PBS 洗滌兩次。按照6孔板每孔加入150-200uL 的裂解液的比例均勻加入裂解液,如果
        細胞密度過高可增加裂解液的量至250-300uL?!咀ⅰ浚毫呀庖哼^少會使細胞裂解不充分,影響蛋白提取的質量。
        2. 用槍吹打數下,轉移裂解液至離心管柱中?!咀ⅰ浚荷倭繘]有裂解的細胞不影響最終蛋白提取的質量。
        3. 14,000 rpm 離心1 min。
        4. 收集離心管底的裂解液即為細胞全蛋白提取液?!咀ⅰ浚杭毎呀庖褐胁缓鞍酌敢种苿?,需要用戶加入蛋白酶抑
        制劑防止蛋白降解。
        非變性液提取
        1. 去除細胞培養液,用預冷的 PBS 洗滌兩次。按照6孔板每孔加入150-200uL 的裂解液的比例均勻加入裂解液,如果
        細胞密度過高可增加裂解液的量至250-300uL?!咀ⅰ浚毫呀庖哼^少會使細胞裂解不充分,影響蛋白提取的質量。
        2. 用槍吹打數下,冰上放置10min后轉移裂解液至離心管柱中。
        3. 14,000 rpm 離心1 min。
        4. 收集離心管底的裂解液即為細胞全蛋白提取液?!咀ⅰ浚杭毎呀庖褐胁缓鞍酌敢种苿?,需要用戶加入蛋白酶抑
        制劑防止蛋白降解。
        二、懸浮細胞
        變性液提取
        1. 收集細胞0.5~2×107
        于1.5mL離心管中,1mL預冷的PBS洗滌兩次,1,000xg 離心3min,棄上清,重復三次。
        2. 根據細胞沉淀體積加入同體積的預冷PBS重懸細胞后,根據細胞量加入對應量的變性裂解液?!咀ⅰ浚罕碇袨橥扑]
        用量;PBS不可多加,只要能使細胞重懸即可。

        細胞沉淀體積(uL)加入裂解液體積(uL)
        320
        550
        10150
        20250
        40500

        3. 劇烈震蕩15s后,轉移裂解液于離心管柱中?!咀ⅰ浚荷倭繘]有裂解的細胞不影響最終蛋白提取的質量。
        4. 14,000 rpm 離心1min(如果裂解液過于粘稠可增加離心時間)。
        5. 收集離心管底的裂解液即為細胞全蛋白提取液?!咀ⅰ浚杭毎呀庖褐胁缓鞍酌敢种苿?,需要用戶加入蛋白酶抑
        制劑防止蛋白降解。
        非變性液提取
        1. 收集細胞0.5~2×107
        于1.5mL離心管中,1mL預冷的PBS洗滌兩次,1,000xg 離心3min,棄上清,重復三次。
        2. 根據細胞量加入對應量的非變性裂解液?!咀ⅰ浚罕碇袨橥扑]用量。
        細胞沉淀體積(uL) 加入裂解液體積(uL)

        細胞沉淀體積(uL)加入裂解液體積(uL)
        320
        550
        10150
        20250
        30500
        40500

        3. 劇烈震蕩15s后,冰上孵育10min。
        4. 轉移裂解液于離心管柱中。
        5. 14,000 rpm 離心1min
        6. 收集離心管底的裂解液即為細胞全蛋白提取液?!咀ⅰ浚杭毎呀庖褐胁缓鞍酌敢种苿?,需要用戶加入蛋白酶抑
        制劑防止蛋白降解。
        3、組織樣品
        變性液提取
        1. 把組織jian切成小碎片。
        2. 加入適當裂解液,一般100mg 組織加入1mL 裂解液?!咀ⅰ浚喝绻呀獠怀浞挚蛇m當增加裂解液。
        3. 用研磨棒在1.5mL離心管中研磨組織或者用玻璃勻漿器,直至充分裂解?!咀ⅰ浚喝绻切募?,皮膚等不易研磨的
        組織應使用勻漿器勻漿。
        4. 轉移裂解液于離心管柱中。
        5. 14,000 rmp 離心1min(如果裂解液過于粘稠可增加離心時間)。
        6. 收集離心管底的裂解液即為全蛋白提取液?!咀ⅰ浚喝绻M織樣品非常小,可剪切后直接加入裂解液并劇烈vortex
        裂解。
        非變性液提取
        1. 組織jian切成小碎片。
        2. 加入適當裂解液,一般100mg 組織加入1ml 裂解液?!咀ⅰ浚喝绻呀獠怀浞挚蛇m當增加裂解液。
        3. 用研磨棒研磨組織勻漿器勻漿,直至充分裂解。冰上放置10min?!咀ⅰ浚喝绻切募?,皮膚等不易研磨的組織應
        使用勻漿器勻漿。
        4. 轉移裂解液于離心管柱中。
        5. 14,000 rmp 離心1min。
        6. 收集離心管底的裂解液即為全蛋白提取液?!咀ⅰ浚喝绻M織樣品非常小,可剪切后直接加入裂解液并劇烈vortex
        裂解。
        注意事項
        1. 本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。
        2. 本產品不含蛋白酶抑制劑,使用中應加入 蛋白酶抑制劑混合物(100×, 不含EDTA)(貨號: AP02L084) 防止蛋白降解。
        3. 本產品不兼容Bradford法測蛋白濃度,請使用 BCA蛋白定量試劑盒(貨號: AP12L025)。

        本產品僅限于科學實驗研究使用,不得用于臨床診斷、治療等領域。




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